碧云天的Porcine IL-10 ELISA Kit (Porcine Interleukin 10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即猪白细胞介素10酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测猪血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-10的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为34.5pg/ml，与人、小鼠、大鼠的IL-10及猪的IFN-γ等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素10 (Interleukin 10, IL-10)又称细胞因子合成抑制因子(Cytokine Synthesis Inhibitory Factor, CSIF)，属于IL-10细胞因子家族。该家族中还包括IL-19、IL-20、IL-22、IL-24和IL-26/AK155。所有的IL-10家族成员都是一种分泌型的具有α-螺旋结构的蛋白。猪IL-10分子量为18kDa，以非二硫键相连的同源二聚体形式存。IL-10前体蛋白包含175个氨基酸，其中包括18个氨基酸的信号肽和157个氨基酸的成熟肽段。成熟的猪IL-10与大鼠IL-10、小鼠IL-10、人IL-10、豚鼠(guinea pig) IL-10、犬IL-10和棉鼠(cotton rat) IL-10分别具有71%、70%、76%、75%、77%和71%的氨基酸同源性。
IL-10能够作用于多种类型的细胞并产生不同的作用效果。例如作用于活化的B细胞时，IL-10能够诱导浆细胞形成，促进IgG或IgA的分泌。在IL-2存在的情况下，IL-10能够作用于CD56+自然杀伤细胞，增加IFN-γ和TNF-α的分泌。当作用于巨噬细胞时，IL-10会减少IL-1、TNF-α和IL-6的产生。IL-10能够下调刺激分子和共刺激分子的表达，从而干预树突状细胞的抗原呈递功能。另外，IL-10还能诱导单核细胞分化为具有细胞毒性的CD16+巨噬细胞，而不是具有抗原呈递作用的树突状细胞。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中猪IL-10的浓度，其原理见图1。猪IL-10特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的猪IL-10会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗猪IL-10抗体后，生物素化抗猪IL-10抗体与猪IL-10结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。 猪IL-10浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中 猪IL-10浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PI529-1 | 猪IL-10抗体预包被板 | 8孔×12条 |
| PI529-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
| PI529-3 | 标准品稀释液 | 10ml |
| PI529-4 | 猪IL-10标准品 | 2-4瓶 |
| PI529-5 | 猪IL-10生物素化抗体 | 10ml |
| PI529-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
| PI529-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
| PI529-8 | TMB溶液 | 10ml |
| PI529-9 | 终止液 | 5ml |
| PI529-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
| PI529-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
| - | 说明书 | 1份 |
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组份4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
党沛 
